Tomografía crioelectrónica
La tomografía crioelectrónica o criotomografía es una técnica de microscopía electrónica de transmisión. Pretende aplicar las elevadas prestaciones de estos instrumentos, que actualmente alcanzan la resolución atómica, intentando salvar los problemas que planteaban anteriormente:
- Preservar las estructuras nativas en condiciones de alto vacío.
- Obtención de estructuras tridimensionales.
- Obtención de suficientes imágenes antes de la destrucción de la muestra por los haces electrónicos de alta energía.
![](../I/Centriolo_Drosophila.jpg.webp)
![](../I/Slice_from_electron_cryotomogram_of_Bdellovibrio_bacteriovorus_cell.jpg.webp)
Para ello se congelan rápidamente las muestras en condiciones que permiten su vitrificación. Existen dos técnicas de congelación de preparados:
- Las muestras finas, de menos de 0,5 μm se congelan rápidamente en etano líquido. Esta técnica es adecuada para células pequeñas y regiones celulares de poco espesor.
- Las muestras de mayor espesor se congelan mediante alta presión, y posteriormente se obtienen secciones finas de un espesor entre 50–200 nm con la muestra aún congelada.
![](../I/Mitocondria_Axon_Presinaptico.PNG.webp)
Previamente las muestras se pueden impregnar con oro coloidal. El microscopio se mantiene en condiciones de congelación. Las imágenes tridimensionales se obtienen mediante algoritmos matemáticos de reconstrucción a partir de imágenes de los objetos tomadas desde múltiples direcciones. A este paso se le denomina "tomografía". Su aplicación restringe el límite de resolución de los detalles a unos 2 nm.
El microscopio se emplea en desarrollos farmacológicos, en el estudio del HIV y en la resolución de estructuras como motores moleculares, poros nucleares o mitocondrias.
Véase también
Referencias
- «The Jensen Laboratory: What we do: Techniques tutorial» (en inglés). 2008. Archivado desde el original el 28 de diciembre de 2008. Consultado el 9 de marzo de 2009.
- Lučić, Vladan; Andrew Leis y Wolfgang Baumeister (agosto de 2008). «Cryo-electron tomography of cells: connecting structure and function». Histochem Cell Biol. (en inglés) 130 (2): 185-96. PMID 18566823. Consultado el 9 de marzo de 2009.
Enlaces externos
- tomviz: Visualización de la tomografía de código abierto y procesamiento de datos
- Modelo de una mitocondria realizado mediante tomografía crioelectrónica.