Microtome
Un microtome est un appareil utilisé pour l'étude par coupe histologique des cellules. Il permet de créer de fines tranches de 2 µm à 25 µm du tissu étudié après congélation ou fixation, obtenue grâce à un solvant (le plus souvent, du formaldéhyde).
Principe
On utilisait autrefois pour la coupe la face la plus tranchante d'un éclat de verre.
Le microtome moderne est construit de manière à produire de fines tranches de matière, un peu comme le fait une machine à couper le jambon opérant un mouvement vertical alternatif supportant le bloc à couper et équipé d'un rasoir prismatique fixe affûté par pâtes diamantées sur plaque de verre.
De nos jours la lame du microtome est souvent en acier ou dans un alliage comme pour les lames de rasoir alors que les ultramicrotomes (spécifique à la microscopie électronique et faisant des coupes pouvant aller jusque 20 nm) sont constitués d'une lame en diamant.
Utilité
Le microtome sert à produire des rubans de coupes de très faible épaisseur, observables au microscope optique, à partir d'un bloc obtenu après inclusion à la paraffine de l'objet à observer (suppression de l'eau contenue) ; les coupes obtenues placées sur lame sont colorées ensuite pour en différencier les cellules et les tissus organiques.
- La technique initiale permettait de faire des coupes de 2 à 25 μm d'épaisseur;
- La méthode par cryosection (en) dans un cryostat par congélation rapide, ne nécessite que 10 minutes au lieu de 16 heures ; Coupes de 10 µm environ.
- L'ultramicrotome permet des coupes de 60 à 100 nm servant en microscopie électronique.
Notes et références
Voir aussi
Articles connexes
Bibliographie
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