الخردل الهجين -11

لقد تم تطوير الخردل المعدل وراثيًا دي أم أتش - 11 في عام 2002 باستخدام مادة وراثية معزولة من بكتيريا التربة[8] غير المسببة للأمراض وتقنيات الأنظمة المعدلة وراثيًا للتحكم في التلقيح، والتي تضمنت بشكل أساسي نظام البارناس - البارستار.[9] حيث تم استخلاص ثلاثة جينات هي بار وبارناس وبارستار من العصية -بكتير عصوي الشكل- أميلوليكوفاسينس لإنتاج البذور المهجنة.[5] وكان السبب الرئيسي لإدخال نظام جينات البارناس - البارستار في خط الخردل المعدل وراثيًا هو لتربية التغاير ومنع الإخصاب الذاتي.[9] ويؤدي إدخال جين بارناس إلى عقم وراثي للذكور عن طريق منع إنتاج الطور المشيجي الذكري (حبوب اللقاح) في نبات الخردل.[5] وفي الوقت نفسه يعمل جين بارستار على استعادة قدرة النبات على إنتاج بذور هجينة خصبة.[5] حيث يعتبر الخردل نباتًا ذاتي التلقيح، مما يجعل من الصعب إجراء التلقيح المتبادل مع خط أبوي ذكر آخر مرغوب فيه دون حدوث تلقيح ذاتي. وقد تسبب جين بارناز في عقم الذكور في دي أم أتش - 11، مما يبسط عملية التلقيح المتبادل لاستنباط أصناف هجينة جديدة. أما السلالتين الأبويتين المستخدمتين لتطوير دي أم أتش -11 فهما طافرة هيرا الأولية (إي أتش -2) التي طورها أنيل خلاتكار (Anil Khalatkar) من جامعة ناجبور،[10] وفارونا بي إن 3.6.[8] ولقد تم الإبلاغ عن وزن بذرة DHM-11 حوالي 3.3 إلى 3.5 جرام (0.12 أونصة) / 1000 بذرة.[10]

وترجع مقاومة الجلوفوسينات دي أم أتش - 11 إلى إنزيم يعبر عنه جين بار (مقاومة بيالافوس) وهو مشتق من الستربتوميسيس الاسترطابي، بينما يشفر جين بار المستنسخ في دي أم أتش-11 لتخليق فوسفينوثريسين- أن- أسيتيل ترانسفيراز (PAT).[11] وهذا الإنزيم مسؤول عن إزالة السموم من العنصر النشط في مبيد الأعشاب جلوفوسينات: فسفينوثريسين.[5] وتتضمن آلية عمل الفوسفينوثريسين تثبيط إنزيم الجلوتامين، الذي يمنع إزالة السموم من الأمونيا وبالتالي يتسبب في تراكم السموم داخل الخلايا النباتية. ويؤدي تثبيط إنزيم الجلوتامين أيضًا إلى انخفاض شامل في مستويات الجلوتامين. في النباتات يعمل الجلوتامين كجزيء إشارة وكمانح رئيسي للأحماض الأمينية لتخليق النيوكليوتيدات.[12] حيث تقوم إنزيمات ببي إيه تي التي ينتجها جين بار بإلغاء تنشيط البيالافوس (السلائف ثلاثية الببتيد للفوسفينوثريسين) من خلال الأستلة لتشكيل منتج غير نشط وغير سام.[11]

في سبتمبر 2015 قدم حرم جامعة دلهي الجنوبي طلبًا إلى لجنة تقييم الهندسة الوراثية يطلب الإذن بالإفراج البيئي عن دي أم أتش - 11.[13] قبل التسويق كان هجين الخردل خاضعًا لتقييم مجال السلامة الحيوية المحصور والمعروف رسميًا باسم تجربة على مستوى أبحاث السلامة الحيوية (BRL)، وذلك تحت إشراف المجلس الهندي للبحوث الزراعية (ICAR).[14] وقد أُجريت هذه التجربة في 2014-2015 بعد الحصول على إذن من لجنة تقييم الهندسة الوراثية (GEAC)، الجهة المنظمة الرئيسية للمنتجات المعدلة وراثيًا في الهند.[14] ثم تم تخصيص دراسات السلامة التي أجريت لـ دي أم أتش - 11 للفئات التالية: التوصيف الجزيئي، وسلامة الغذاء، والسلامة البيئية، وبروتوكولات الكشف.[15] كما يتضمن التوصيف الجزيئي دراسات تعبيرية عن جينات بار وبارناس وبارستار التي تم إدخالها في تسلسل الحمض النووي لـ دي أم أتش-11.[15] وفحصت اختبارات سلامة الغذاء سمية البروتينات الثلاثة في دي أم أتش - 11، وذلك باستخدام تحليل المعلومات التركيبية والحيوية.[15] وقد اختبرت تجارب السلامة البيئية إمكانية إزالة الأعشاب الضارة والمعايير الصارمة لـ دي أم أتش - 11.[15] كما لم يتم الإعلان عن تفاصيل ونتائج تجارب السلامة هذه حتى الآن.

وهناك ملخص لتقييم السلامة متاح على الإنترنت ومع ذلك تم حجب البيانات الأولية عن الجمهور من قبل وزارة البيئة والغابات (MoEF).[16] بحيث لا يمكن الوصول إليه إلا من خلال تقديم طلب إلى وزارة البيئة والموارد الطبيعية.[16] وتم تحميل تقييم السلامة الرسمي المكون من 133 صفحة لـ دي أم أتش - 11، بعنوان «تقييم سلامة الغذاء والبيئة لجنرال إلكتريك الخردل» على موقع GEAC على الويب للحصول على تعليقات الجمهور، حيث تلقى 750 تعليقًا من الجمهور.[13] تمت مراجعة هذه التعليقات بعد ذلك من قبل لجنة فرعية، وتم دمجها في تقرير تقييم السلامة النهائي المقدم إلى GEAC.[13] واستنتج التقرير أن دي أم أتش - 11 آمن للاستهلاك البشري ويحتوي على قيمة غذائية.[17] كما أعلنت أنيتا براساد رئيسة GEAC أن اللجنة ستوصي بشكل إيجابي بالـ دي أم أتش - 11 لوزير البيئة أنيل مادهاف ديف للزراعة.[17]

وقد أقرت GEAC في البداية الدي أم أتش - 11 للزراعة التجارية، ومع ذلك فقد تراجعوا عن موافقتهم عند اتخاذ قرار بأن هناك حاجة إلى مزيد من الاختبارات والبيانات الإضافية المتعلقة بتأثير دي أم أتش-11 على الملقحات الحشرية ولا سيما نحل العسل وعلى التنوع الميكروبي للتربة قبل التسويق.[18] وتقدم مركز المعالجة الجينية لنباتات المحاصيل بجامعة دلهي بطلب للحصول على إذن بزراعة قطعة أرض دي أم أتش - 11 في دلهي والبنجاب وذلك لاختبار آثار الخردل المعدل وراثيًا على نحل العسل.[18] وفي مارس 2018 وافقت لجنة تقييم الهندسة الوراثية على دي أم أتش - 11 للدراسات الميدانية للتحقيق في آثاره المحتملة على نحل العسل والحشرات الملقحة الأخرى.[19] وستجرى التجارب الميدانية في جامعة البنجاب الزراعية ومعهد البحوث الزراعية الهندي.[19]

عينت المحكمة العليا الموقرة في الهند لجنة الخبراء التقنيين (TEC) التي أوصت في تقريرها لعام 2013 بفرض حظر تام على المحاصيل المعدلة وراثيًا والتي تتحمل مبيدات الأعشاب.[20] وقد كان أحد الأسباب التي ذكرها المجلس التنفيذي للتكنولوجيا هو احتمال حدوث آثار صحية سلبية نتيجة استخدام المزارعين بكثرة لمبيدات الأعشاب على محاصيلهم.[20]

أحد الأسباب الرئيسية لتسويق الدي أم أتش - 11 هو احتمال تكوين «أعشاب خارقة». كما أن الدي أم أتش - 11 متسامح مع الجلوفوسينات وبالتالي يُعتقد أنه يشجع المزارعين على رش مبيدات الأعشاب بحرية عند تسويقها. يتسبب هذا في ضغط اختيار اصطناعي على الأعشاب الضارة مما قد يؤدي إلى ظهور أنواع أعشاب مقاومة للجلوفوسينات.[20] ومع ذلك فإن أكبر مصدر قلق فيما يتعلق بزراعة دي أم أتش-11 تجاريًا هو التلوث الجيني المحتمل للتنوع البيولوجي الغني لجنس البراسيكا، فمن خلال التلقيح المتبادل بين دي أم أتش-11 والمجموعات البرية.[20] تخضع نباتات الخردل للتلقيح بوساطة الرياح والحشرات. وبسبب قابليتها للتهجين هناك احتمال أن تكون الأصول الوراثية الغنية بالخردل في الهند تتكون من أصناف برية وسلالات محلية مستأنسة ملوثة بشكل لا رجعة فيه.[20]

في عام 2004 نصح رئيس فريق العمل في مجال التكنولوجيا الحيوية الزراعية بعدم الاستغلال التجاري للمحاصيل المقاومة لمبيدات الأعشاب لأنها تلغي الحاجة إلى إزالة الأعشاب الضارة يدويًا، وهي مهمة تقوم بها العديد من النساء الريفيات في الهند.[20] قدّرت كافيتا كوروجانتي عضو التحالف من أجل الزراعة المستدامة والشاملة أن نمو 25٪ من دي أم أتش - 11 سيؤدي إلى خسارة 4.25 كرور يوم عمل لكثير من النساء.[21]

سبب آخر للمعارضة القوية ضد تسويق دي أم أتش - 11 في جميع أنحاء الهند يرجع إلى التجارب السلبية السابقة مع المحاصيل المعدلة وراثيًا، وعلى الأخص قطن بي تي في ولاية ماهاراشترا. وكان هناك ارتباط مقترح بين الأداء الضعيف للقطن بي تي، وعدد كبير من حالات انتحار المزارعين، لا سيما في عام 2004.[22][23] ويعتقد المتظاهرون أن الدي أم أتش-11 تسبب بأن تكون أسعار البذور باهظة، إلى جانب الإنتاجية المنخفضة يمكن أن تؤدي إلى صعوبات مالية وضغوط اقتصادية وربما المزيد من الانتحار بين المزارعين.[24] ومع ذلك فقد ثبت أن العلاقة بين زراعة المحاصيل المعدلة وراثيًا وانتحار المزارعين لا أساس لها من خلال البيانات المتاحة، وعلى الرغم من استخدامها كنقطة نقاش مشتركة ضد التكنولوجيا الحيوية الزراعية داخل الهند.[25][22]

أظهر الدي أم أتش - 11 تغاير الغلة في حدود 19٪ - 40٪ مقارنة ببعض أفضل الأصناف الهندية.[26] ومع ذلك هناك سمتان وُجِدت أنهما ضعيفتا التطور والتعبير عنهما في الصنف الهجين. وهي حجم البذور وطول السيليكا.[26] كلًا من هاتين السمتين مكونات محصول مهمة. ووجدت تجربة أخرى متعددة المواقع أجريت في ظل الظروف الميدانية أن الدي أم أتش - 11 ينتج غلة أكثر بنسبة 30 ٪ من السلالات الحالية من أصناف الخردل التقليدية.[27]

خضع الدي أم أتش - 11 أيضًا لاختبار الحساسية الغذائية باستخدام مقارنات المعلوماتية الحيوية باتباع إرشادات CODEX وICMR لفحص ما إذا كان تسلسل الأحماض الأمينية لبروتينات بار وبارناس وباستار من مسببات الحساسية المحتملة.[9] وقد تم إجراء الاختبار عن طريق تحديد أي أوجه تشابه بين تسلسل الأحماض الأمينية للبروتينات الثلاثة وتلك الخاصة بمسببات الحساسية المفترضة الأخرى.[9] ثم تم تقييم إطارات القراءة المفتوحة المحتملة في موقع إدخال الحمض النووي للجينات الثلاثة، من أجل أوجه التشابه المحتملة مع المواد المسببة للحساسية الموجودة في قاعدة بيانات AllergenOnline.org.[9] ووجدت نتائج الدراسة أن الدي أم أتش - 11 لا يمثل أي خطر من حساسية الطعام للمستهلكين.[9] وتم اقتراح تجارب أخرى على الدي أم أتش - 11 مثل إجراء اختبار IgE في مصل الدم البشري.[9]